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牛肠道病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作  者:
侯佩莉;程洪兵;刘晓;王洪梅;何洪彬
单  位:
山东省农业科学院奶牛研究中心
关键词:
牛肠道病毒;3D基因;RT-PCR;检测
摘  要:
参照GenBank中登录的牛肠道病毒(BEV)全基因组序列,针对其3D基因设计合成了1对特异性引物,提取病毒RNA,逆转录为cDNA,进行PCR扩增,经条件优化,建立了BEV的RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性进行验证。结果显示,该方法从分离的牛肠道病毒中扩增出了732 bp的特异性目的片段;且对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛轮状病毒(BRV)、牛冠状病毒(BCoV)等相关病毒均无交叉反应;其检出敏感度达10-1TCID50。应用该方法对山东地区84份临床疑似发病牛样品进行检测,21份为阳性,阳性检出率为25%。
译  名:
Establishment and Application of RT-PCR for Detection of Bovine Enterovirus
作  者:
Hou Peili;Cheng Hongbing;Liu Xiao;Wang Hongmei;He Hongbin;Dairy Cattle Research Center,Shandong Academy of Agricultural Sciences;
关键词:
Bovine enterovirus;;3D gene;;RT-PCR;;Detection
摘  要:
A reverse transcription PCR( RT-PCR) method for detection of bovine enterovirus( BEV) was established using a pair of specific primers designed based on the 3D gene of BEV in GenBank. This method could specifically amplify a 732-bp fragment from BEV strain,but not from bovine viral diarrhea virus( BVDV),infectious bovine rhinotracheitis virus( IBRV),bovine coronavirus( BCoV) and bovine rotavirus virus( BRV). The detection limit of this method was 10-1TCID 50 of BEV. In a detection of 84 samples suspected with bovine disease,21 samples were positive with the positive rate as 25%.

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