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Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒3C基因在昆虫细胞的表达与检测

作者：

吴植;顾玲玲;朱善元;王安平

单位：

江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室

关键词：

Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒;3C基因;昆虫细胞;表达

摘要：

利用杆状病毒表达系统进行Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒蛋白水解酶3C基因的表达研究。首先通过PCR方法扩增出3C基因,亚克隆至杆状病毒转移载体p Fast Bac1中,获得重组转座载体p FB-3C,随后将该重组质粒转化感受态细胞DH10Bac进行同源重组,经蓝白斑筛选及PCR鉴定后,获得重组杆状病毒穿梭质粒r Bacmid-3C,将其在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒r Bac-3C,并进行重组蛋白表达的检测。间接免疫荧光结果,鸭抗全病毒阳性血清能够与重组蛋白发生特异性结合。结果表明,DHAV-Ⅰ3C蛋白在sf9昆虫细胞中获得了成功表达。

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