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猪主要免疫抑制性疾病四重PCR检测方法的建立与应用

作  者:
李凤琴;杨定勇;原茜;曹飞;聂民财;朱玲;徐志文
单  位:
四川农业大学动物医学院;成都农业科技职业学院;四川荣州动物药业有限公司
关键词:
猪繁殖与呼吸综合征病毒;猪圆环病毒2型;猪细环病毒;猪巨细胞病毒;多重PCR;
摘  要:
为建立一种可以快速检测猪巨细胞病毒(PCMV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细环病毒(TTV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的四重PCR检测方法,本研究设计合成了4对特异性扩增引物,在系统性地优化反应体系、反应条件的基础上,分别对其特异性和敏感性进行验证,建立了能够快速检测以上4种病原的多重PCR方法,并对131份临床样品进行了检测。结果显示,该检测方法特异性好,灵敏度高,对PRRSV、PCV2、TTV和PCMV的最低检出量分别为2.4×103copies/μL、3.5×105copies/μL、6.2×102copies/μL、5.6×103copies/μL。以单一PCR方法对所有临床样品进行检测后发现,检测结果与多重PCR检测结果一致,证明该多重PCR方法可以用于这4种病原的快速检测。

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