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轮状病毒SA11株NSP2蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

作  者:
陈肖宏;闻晓波;冉旭华
单  位:
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
关键词:
轮状病毒;NSP2蛋白;原核表达;多克隆抗体
摘  要:
构建轮状病毒SA11株NSP2蛋白原核表达质粒,纯化重组蛋白并制备多克隆抗体.根据GenBank中登录的轮状病毒SA11株NSP2基因组序列(LC178571.1)设计特异性引物,用PCR方法扩增并将其连接至pET-28a(+)载体,构建重组表达质粒pET-28a-NSP2,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定.将纯化后的重组蛋白与ISA206佐剂乳化免疫豚鼠,制备NSP2多克隆抗体,并通过ELISA测定抗体效价.重组蛋白以包涵体的形式表达,相对分子质量为35 kDa,ELISA法测定多克隆抗体效价>1:5000.成功表达了轮状病毒SA11株NSP2蛋白并获得其多克隆抗体,为NSP2蛋白结构与功能的研究奠定基础.
译  名:
Prokaryotic Expression of NSP2 Protein of Rotavirus and Preparation of Polyclonal Antibody

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