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Position: Home > Articles > 利用GFP-Trap和酵母双杂交技术筛选TaPR1互作靶标 Journal of Agricultural University of Hebei 2021 (5) 64-70,112

利用GFP-Trap和酵母双杂交技术筛选TaPR1互作靶标

作  者:
申松松;王菲;耿怀民;孟麟硕;冯燕;王海燕
单  位:
河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心
关键词:
小麦叶锈菌;病程相关蛋白PR1;GFP-Trap;酵母双杂交;互作蛋白;
摘  要:
病程相关蛋白PR1(pathogenesis related PR1 proteins, PR1)在小麦抗病防御反应中发挥重要作用。本试验是在前期研究基础上,借助烟草成功表达TaPR1蛋白,利用GFP-Trap技术结合质谱分析获得与TaPR1互作的蛋白。同时,利用酵母双杂交技术(Yeast two-hybrid, Y2H)在接种叶锈菌生理小种PHNT的‘中国春’小麦酵母文库中筛选获得与TaPR1互作的寄主蛋白。经过序列比对分析,2种方法共同筛选出谷氨酰氨合成酶(Glutamine synthetase)、细胞色素b6(Cytochrome b6)、应激蛋白(Stress protein)等可能与TaPR1互作的蛋白,为进一步深入研究TaPR1参与小麦叶锈病防御反应的分子机制提供了理论基础。

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