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Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine
2018
(2)
94-97
猪瘟疫苗中BVDV污染一步法RT-PCR检测方法的建立与应用
作 者：
葛玉凤;崔治亮;高广仁;刘学荣;武发菊;安芳兰
关键词：
猪瘟(CSF)疫苗;牛病毒性腹泻病毒(BVDV)污染;一步法RT-PCR;检测方法;方法建立
摘 要：
为建立一种快速检测猪瘟(CSF)疫苗中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)污染的方法,试验根据GenBank上登录的BVDV 5'端非编码区基因组序列设计1对引物,经一步法RT-PCR反应条件的优化,建立了检测猪瘟疫苗中BVDV污染的一步法RT-PCR.结果表明:该方法对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、牛副流感病毒3型、牛传染性鼻气管炎病毒的扩增结果均为阴性,对BVDV基因组RNA的检测灵敏度达0.1 ng,与细胞培养法的符合率达100%.应用该方法对猪瘟疫苗、牛血清等138份样品进行BVDV污染的检测,阳性污染率达11.59%.该一步法RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、准确性和适用性,可用于猪瘟疫苗生产中血清、细胞、毒种、半成品等的质量控制及猪瘟疫苗临床应用中的质量检验.
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