当前位置: 首页 > 文章 > 小鼠睾丸、附睾和前列腺组织细胞外囊泡蛋白质组分的鉴定及功能分析 西北农林科技大学学报(自然科学版) 2021,49 (6) 8-17
Position: Home > Articles > Proteomic profiling and functional analysis of extracellular vesicles in mouse testis,epididymis and prostate Journal of Northwest A & F University(Natural Science Edition) 2021,49 (6) 8-17

小鼠睾丸、附睾和前列腺组织细胞外囊泡蛋白质组分的鉴定及功能分析

作  者:
孙欣;袁业锋;李海雁;冯雅琴
单  位:
山西医科大学基础医学院;首都医科大学附属北京儿童医院
关键词:
细胞外囊泡;睾丸组织;附睾组织;前列腺组织;小鼠;蛋白功能分析
摘  要:
[目的]对睾丸、附睾和前列腺组织细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)蛋白质组分进行鉴定,以明确其在精子发生、成熟及功能维持方面所发挥的作用.[方法]用总外泌体分离试剂盒(total exosome isolation,TEI)分别富集小鼠睾丸、附睾和前列腺组织的EVs,用免疫印迹法对EVs进行鉴定.用透射电镜观察EVs的形态,动态光散射粒径分析仪(dynamic light scattering,DLS)分析其直径分布.用液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)分析EVs的蛋白质组分,运用DAVID 6.8在线分析工具从细胞组分、分子功能、生物学过程三方面对筛选出的蛋白质进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析.[结果]用TEI法分离纯化的EVs均可检测到分化抗原63(cluster differ-entiation antigen 63,CD63)和肿瘤易感基因101 (tumor susceptibility gene 101,TSG101)标记蛋白,表明EVs分离成功.透射电镜下观察EVs呈凹杯状,睾丸组织来源的EVs以直径30~140 nm的居多,附睾组织EVs直径在105 nm处有峰值,前列腺组织EVs直径在50和90 nm处有峰值.用LC-MS/MS分析3种EVs的蛋白组分,睾丸组织EVs筛选到1148种蛋白,附睾组织EVs筛选到902种蛋白,前列腺组织EVs筛选到651种蛋白.睾丸组织EVs特有蛋白有667种,主要参与RNA加工及剪切、精子发生、DNA损伤应答等生物学过程;附睾组织EVs特有蛋白有311种,主要参与转运、代谢和免疫作用等生物学过程;前列腺组织EVs特有蛋白有142种,主要参与代谢活动等.三者共有蛋白277种,主要发挥蛋白质结合、RNA结合等分子功能,参与蛋白质翻译和运输等生物学过程.[结论]睾丸、附睾和前列腺组织EVs分别在精子发生、精子的睾丸后成熟及功能维持中发挥一定的作用.
译  名:
Proteomic profiling and functional analysis of extracellular vesicles in mouse testis,epididymis and prostate

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