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鸡传染性贫血病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立

作  者:
张艳芳;谢芝勋;邓显文;谢志勤;张民秀;罗思思;谢丽基;范晴;曾婷婷;黄娇玲;王盛;刘加波
单  位:
广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室
关键词:
鸡传染性贫血病毒;鸡细小病毒;多重PCR;
摘  要:
为研究一种可同时检测鸡传染性贫血病毒(CIAV)和鸡细小病毒(ChPV)的双重PCR方法,本试验根据GenBank中CIAV的VP基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为219 bp和384 bp的特异性引物,通过对反应条件的优化,特异性和敏感性试验,建立和评价双重PCR检测方法。结果显示,该方法最佳引物比例为CIAV上下游引物各0.4μL(20μmol/L),ChPV上下游引物各0.6μL(20μmol/L);最佳退火温度为56.1℃;灵敏度可达到66 fg(CIAV)和78 fg(ChPV);对常见鸡病病原体进行检测,结果全为阴性。结果表明,本试验所建立的双重PCR方法具有特异、敏感、快速、稳定等优点和优势,可用于同时快速鉴别诊断CIAV和ChPV的混合感染。

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