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华支睾吸虫囊蚴RPA检测方法的建立

作  者:
张春玲;邱阳元;郝朔;白雪;刘明远;张藜潇;刘晓雷
单  位:
吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室
关键词:
华支睾吸虫;囊蚴;RPA;COX-1;特异性;灵敏性;
摘  要:
为了建立灵敏、快速的鉴别华支睾吸虫诊断方法,本研究根据华支睾吸虫囊蚴的COX-1基因序列设计引物,建立检测华支睾吸虫囊蚴的RPA方法。结果显示:所建立的RPA的灵敏度可达到2.75 ng/μL,而与日本血吸虫、隐孢子虫、阔节裂头绦虫、东方次睾吸虫囊蚴、台湾次睾吸虫囊蚴、异尖线虫和棘颚口线虫均无交叉反应;经条件优化后,可在35℃下5 min内观察到检测结果。另外,在对实际样品检测中,通过添加核酸染料SYBR GreenⅠ,无需PCR仪及紫外凝胶系统的条件下,可以快速地鉴别出华支睾吸虫囊蚴及虫卵。结论,本研究成功地建立了华支睾吸虫囊蚴PRA检测方法,这在食品安全检测中具有重要的应用前景。

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