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Position: Home > Articles > Alternative methods to animal experiment for carcinogen detection by GADD153 promoter Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2014,46 (6) 33-36

利用GADD153启动子建立替代动物试验检测致癌物的方法研究

作  者：
韩喜彬;王立辛;巴彩凤
单  位：
辽宁医学院基础医学院;辽宁医学院畜牧兽医学院
关键词：
替代方法;生长抑制与DNA损伤基因153;致癌物
摘  要：
本试验旨在构建可在一定程度上代替动物试验,用于快速筛查化合物致癌性的重组SMMC-7721细胞株。方法:构建含有生长抑制与DNA损伤基因153(GADD153)启动子和绿色荧光蛋白报告基因的重组质粒,稳定转染SMMC-7721细胞;以荧光检测CdCl2对转染细胞的DNA损伤效应;同时以RT-PCR检测内源性GADD153 mRNA的表达,验证荧光强度、GADD153 mRNA表达量依CdCl2浓度变化的剂量依赖关系。结果表明:随着CdCl2浓度的增加,GADD153-EGFP细胞株的荧光强度、GADD153 mRNA表达量呈剂量依赖性增加。重组GADD153-EGFP细胞株可检测致癌物的DNA损伤效应,说明此方法代替动物实验是可能的。
译  名：
Alternative methods to animal experiment for carcinogen detection by GADD153 promoter
作  者：
HAN Xibin;WANG Lixin;BA Caifeng;Experimental Animal Center of Liaoning Medical University;Husbandry and Veterinary Academy of Liaoning Medical University;
关键词：
alternative methods;;GADD153;;carcinogens
摘  要：
The aim of this study is to construct a recombinant GADD153-EGFP cell lines that could replaced the animal experiment to some extent for detection of carcinogen. A recombinant plasmid containing DNA damage and repair inducible gene 153(GADD153) promoter and green fluorescence protein reporter gene was constructed,and then transfected into SMMC-7721 cells. DNA damage induced by CdCl2was detected by bioluminescence,and endogenic GADD153 mRNA level was detected by RT-PCR to verify the dose-response relationship of fluorescence intensity and GADD153 mRNA expression. With the increase of concentration of CdCl2,fluorescence intensity and GADD153 mRNA expression quantity increased with a dose-dependent manner in GADD153-EGFP cell lines. Recombinant GADD153-EGFP cell could detect DNA damage effects,indicating that it was possible that this method replaced animal test.

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