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BVDV Erns抗体ELISA检测方法的建立及初步应用

作  者:
刘勃兴;刘畅;王利丽;付祥;吴同垒;刘洁;高荣菊;张志强;史秋梅
单  位:
河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室;河北省唐山市乐亭县农业农村局
关键词:
牛病毒性腹泻病毒;Erns蛋白;ELISA;

摘  要:
为了解河北地区牛群牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)抗体阳性率,本研究利用E.coli原核表达系统表达了Erns蛋白。以该蛋白为包被抗原,通过优化各反应条件,建立了检测BVDV抗体的间接ELISA方法,并利用该方法检测河北地区477份牛血清样品的BVDV抗体阳性率。特异性试验结果显示,本研究建立的BVDV抗体ELISA检测方法仅能检出BVDV抗体阳性血清,而检测牛传染性鼻气管炎病毒阳性血清、牛布鲁菌阳性血清、牛轮状病毒阳性血清、牛冠状病毒阳性血清、口蹄疫病毒阳性血清均为阴性。敏感性试验结果显示,建立的ELISA方法检测BVDV阳性血清具有较高的敏感性。重复性试验结果显示,ELISA检测方法的批内和批间变异系数均小于10%。应用本研究建立的抗体ELISA检测方法与IDEXX试剂盒检测某牛场90份血清样品,总符合率为93.33%。对河北地区18个牛场的477份血清样品进行检测,结果接种疫苗牛场的血清阳性率为30.43%~92.86%,未接种免疫牛场抗体阳性率为0%~100%。结果表明,本研究建立的BVDV抗体ELISA检测方法具有较高的特异性、敏感性和重复性,可应用于临床牛血清样品检测,为河北地区BVDV的监测和防控提供技术支持。

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