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丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对氧化应激鸭小肠上皮细胞屏障功能的影响

作  者:
郑超;皮劲松;吴艳;魏文焯;梁振华;杜金平;刘静波;张昊
单  位:
湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;西南科技大学生命科学与工程学院
关键词:
MAPK信号通路;鸭;肠上皮细胞;氧化应激;肠屏障
摘  要:
本试验旨在研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在应激鸭肠上皮屏障功能中的调节作用.取原代鸭小肠上皮细胞,H2O2诱导氧化应激(终浓度50μmol/L).试验分为空白对照组(A组)、阳性对照组(50μmol/L H2O2,B组)和氧化应激基础上添加丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂组(10μmol/L SB203580,C组).使用CCK-8测量细胞活力,细胞电阻仪检测细胞跨膜电阻(TEER),实时荧光定量-聚合酶链式反应(q-PCR)检测氧化应激相关基因和紧密连接蛋白mRNA的表达.结果表明:①与A组相比,B组细胞活力下降到80%左右(P<0.05);与B组相比,C组细胞活力提高(P<0.05).②与A组相比,B、C组TEER降低(P<0.05),C组TEER高于B组(P<0.05).③与A组相比,B组Nrf2/HO-1相对表达量升高(P<0.05),C组Nrf2/HO-1相对表达量低于B组(P<0.05).④与A组相比,B组claudin-1、occludin相对表达量较A组降低(P<0.05),C组claudin-1、occludin相对表达量高于B组(P<0.05).由此可见,SB203580在一定程度上能够促进鸭小肠上皮细胞的生长,可有效缓解H2O2引起的氧化损伤,同时增加氧化损伤过程中occludin和claudin-1的表达量,通过增强细胞紧密连接,促进鸭肠上皮屏障功能维持.

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