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利用EMS诱变创制抗除草剂粳稻新种质

关键词:
粳稻;抗烟嘧磺隆;抗甲咪唑烟酸;抗除草剂;EMS诱变;种质创建;
摘  要:
为了创制抗除草剂水稻新种质,用EMS(甲基磺酸乙酯)溶液浸泡郑稻19干种子,在M2幼苗三叶期分别喷施112.5 g/hm2的甲咪唑烟酸和60 g/hm2的烟嘧磺隆,14 d后筛选抗除草剂突变体,并对突变体ALS(Acetolactate synthase)基因序列进行分析,找出ALS基因突变位点。结果表明,喷施甲咪唑烟酸14 d后,抗除草剂植株生长正常、叶色偏绿,敏感植株黄化、生长受抑制;喷施烟嘧磺隆14 d后,抗除草剂植株表现前期受抑制,但能缓慢恢复。用甲咪唑烟酸筛选63 000份M2家系,获得抗除草剂突变体6份(HF1—HF6),包括2种ALS氨基酸突变类型:Ser-627-Asn和Gly-628-Glu。用烟嘧磺隆筛选M2家系30 000份,获得抗除草剂突变体2份(HF7—HF8),包括2种ALS氨基酸突变类型:Pro-171-Ser和Ala-179-Val。在M2筛选到1个特定ALS碱基突变平均需23 250份M2家系。筛选到的抗甲咪唑烟酸突变体HF1(Gly-628-Glu)和HF2(Ser-627-Asn)在1倍大田常规除草剂剂量(112.5 g/hm2)下鲜质量减退率分别为13.09%和20.03%,显著小于郑稻19(P<0.05);在8倍大田常规除草剂剂量(900 g/hm2)下突变体仍能正常生长,表现强的甲咪唑烟酸抗性。对HF1、HF2分别喷施30 g/hm2和60 g/hm2烟嘧磺隆,其鲜质量减退率分别为24.81%、13.13%和34.13%、28.01%,显著小于郑稻19(P<0.05),表现一定的烟嘧磺隆抗性。综上,筛选到8份抗除草剂突变体材料,2份抗烟嘧磺隆,6份抗甲咪唑烟酸,其中2份抗甲咪唑烟酸突变体兼具烟嘧磺隆抗性,创制的抗除草剂材料可用于选育非转基因抗除草剂品种,也可作为创制ALS多位点突变种质的基础材料,进一步增强突变体对除草剂的抗性。

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