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猪非典型瘟病毒云南株Mut蛋白的特征分析及其对宿主细胞NF-κB转录活化的影响

作  者:
何维琪;姜光飞;高艺;梁龙舟;杨玉艾;孙永科
单  位:
关键词:
猪非典型瘟病毒;生物信息学;Mut蛋白;NF-κB转录活性;p65
摘  要:
猪非典型瘟病毒(APPV)是近年来新发现的猪病毒性病原,给养猪业健康发展带来了严重的威胁.课题组前期研究发现了APPV云南株(APPV-YN)导致感染猪临床症状非典型化的关键基因 Mut,为探讨APPV-YN Mut 的生物学特征及其对宿主细胞 NF-κB信号通路转录活化的影响,揭示 APPV 非典型化的机制.利用SnapGene、ProtParam、PredictProtein、TMHMM、SignaIP 4、ProtScale 等在线软件对 AP-PV-YN Mut 基因表达蛋白的理化性质、亚细胞定位、磷酸化位点等进行分析预测;将重组载体 pCMV-Mut转染至 HEK-293 细胞,确定蛋白稳定表达后利用 TNF-α刺激 NF-κB 信号通路使其活化,分析 APPV-YN Mut对NF-κB转录活性及其对NF-κB P65 核质转运的影响.生物信息学分析结果显示,Mut 蛋白为亲水性的稳定蛋白,无跨膜结构和信号肽,可能主要定位于细胞质,二级结构主要以无规则卷曲为主,三级结构稳定,可能作用于PKC、P38MAPK、PKA、EGFR、CDK5 等相关激酶及蛋白受体;Mut 蛋白在 HEK-293 细胞成功表达,大小约为 15 ku;Mut对 TNF-α激活的 NF-кB转录活化有明显抑制作用,干扰 NF-κB P65 的入核,抑制核质穿梭过程.研究结果为后续进一步在分子水平上探究Mut在APPV非典型化中的作用奠定了基础.
译  名:
Mut Protein Characterization of Atypical Porcine Pestivirus Yunnan Strain and Its Effect on Transcriptional Activation of NF-κB in Host Cells

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