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Position: Home > Articles > 毛白杨细胞色素C还原酶的基因克隆、表达和亚细胞定位 Molecular Plant Breeding 2020 (8) 2423-2430

毛白杨细胞色素C还原酶的基因克隆、表达和亚细胞定位

作  者：
曾琪琦;蒋湘宁;盖颖
单  位：
北京林业大学生物科学与技术学院
关键词：
毛白杨(Populus tomentosa);CPR;P450;亚细胞定位
摘  要：
为克隆得到毛白杨CPR基因、成功在体外表达可溶性蛋白并通过构建GFP偶联载体观察其亚细胞定位,本研究通过RT-PCR的方法克隆得到了毛白杨CPR基因,登录号为MK575137.进一步通过生物信息学分析,发现毛白杨CPR与毛果杨CPR同源性最高,均有着典型的细胞色素C还原酶结构域.随后在酵母表达体系中表达该蛋白,验证了该蛋白不能被分泌表达,表明CPR蛋白为膜蛋白.进一步的亚细胞定位实验表明,CPR蛋白定位于内质网.CPR蛋白是P450单加氧化酶催化木质素合成的相关过程中必不可少的辅酶,该研究可为今后体外验证毛白杨P450单加氧化酶在木质素合成的相关过程中的酶活活性提供基础.

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