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Position: Home > Articles > 哈维氏弧菌RT-LAMP检测方法建立与应用 Journal of Fishery Sciences of China 2018 (6)

哈维氏弧菌RT-LAMP检测方法建立与应用

作  者:
涂志刚;杨海朋;崔婧;严耿杰;李丹萍;周永灿;邱名毅
单  位:
海南省海洋与渔业科学院;广州迪澳科技有限公司;海南大学海洋学院
关键词:
RT-LAMP;哈维氏弧菌;卵形鲳鲹;烂身病;快速检测
摘  要:
哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是引起海南省后水湾深水网箱养殖卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)"烂身病"的主要病原菌.为了能够快速诊断该病原菌,急需建立一种耗时短、准确以及便捷的检测方法.本研究利用分离到的致病菌株QT520的ToxR基因序列设计特异性引物和加入SYTO-9特异荧光染料,建立了一种可以实时、快速检测哈维氏弧菌的LAMP法(RT-LAMP).该方法对哈维氏弧菌的基因组DNA及菌液灵敏度分别为100 fg/μL和10~3 cfu/mL,与Real-time PCR法检测灵敏度相当,比普通PCR的检测灵敏度要分别高1000倍和10倍,能有效区分哈维氏弧菌与坎氏弧菌(Vibrio campbellii);可以实时观察检测结果,且检测时间只需要40 min;具有耗时短、特异性和灵敏度高、仪器便携、操作简单且能实时观察检测结果等优点,非常适合在生产现场进行哈维氏弧菌的检测.
单  位:
TU Zhigang%YANG Haipeng%CUI Jing%YAN Genjie%LI Danping%ZHOU Yongcan%QIU Mingyi%Hainan Academy of Ocean and Fisheries Sciences%The Ocean College, Hainan University%Guangzhou Deaou Bio-Tech Co.

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