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新型CephodexD微载体在猪瘟病毒大规模增殖中的应用研究

作  者:
梅建国;庄金秋;吴信明;刘吉山;苗立中;张颖;谢金文;林初文;王本琢;丁壮
关键词:
ST细胞;猪瘟病毒;微载体;生物反应器;悬浮培养
摘  要:
旨在应用新型Cephodex D微载体悬浮培养ST细胞增殖猪瘟病毒.通过优化工艺条件初步实现了病毒抗原的大规模高效生产,培养过程采用流加方式保证ST细胞的营养供应.用含6%(v/v)无牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)及其抗体的双阴牛血清MEM生长液培养ST细胞.当达到3.8*109个细胞时,接种入生物反应器中,Cephodex D微载体用量为4 g/L.当反应器内ST细胞生长至48 h,接种猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)液.继续培养4 d后进行首次病毒收获,之后每3 d收获1次,直至第5次收毒结束.整个培养过程持续18d,细胞培养至72 h,密度可达2.8*106cells/m L,生产的CSFV滴度均在100万兔体反应量(RID)/m L以上.较现有的国家标准相比,应用生物反应器和新型Cephodex D微载体悬浮培养技术,不仅病毒滴度提高了1倍,而且整个生产周期缩短了5 d,大大提高了生产效率.因此,本研究采用的新型微载体悬浮培养工艺在CSFV大规模生产中具有重要的应用价值.
单  位:
MEI Jianguo%ZHUANG Jinqiu%WU Xinming%LIU Jishan%MIAO Lizhong%ZHANG Ying%XIE Jinwen%Lin Chuwen%Wang Benzhuo%DING Zhuang%College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University%Shandong Binzhou Animal Science & Veterinary Medicine Institute%Binzhou Bio-carrier Biotechnology Co.Ltd.%Wudi County Animal Husbandry and Veterinary Bureau

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