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外泌体介导小反刍兽疫病毒疫苗株N75-1在细胞间的传播

作  者:
张乐言;万阳丽;王婉泽;许其华;马楠謌;王晶钰;齐雪峰
单  位:
西北农林科技大学动物医学院;山东省利津县动物疫病防治监控中心
关键词:
小反刍兽疫病毒;非洲绿猴肾细胞;外泌体;感染性RNA;
摘  要:
本研究旨在探究外泌体介导小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus, PPRV)在细胞间传播的作用。通过免疫荧光、Western blot和TCID50测定等方法检测PPRV疫苗毒株N75-1感染Vero细胞源外泌体(PPRV-exosome)共培养对细胞(正常Vero细胞)PPRV感染和复制的影响。结果显示,分离纯化到典型的"杯托状"外泌体,且PPRV-exosome中含有完整的PPRV基因组。外泌体共培养结果显示,与PPRV-exosome共培养的细胞中出现明显细胞病变;与正常细胞源外泌体(Mock-exosome)共培养细胞相比,PPRV-exosome共培养组可见PPRV阳染细胞且病毒增殖水平显著增加(P<0.05)。进一步研究表明,外泌体抑制剂(GW4869)可导致外泌体介导的PPRV在细胞中的复制呈现剂量依赖性降低。以上结果表明,外泌体能够介导PPRV感染性RNA在细胞间传递并建立增殖性感染。

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