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斑马鱼nos2a基因的生长调控作用

作者：

高磊;黄亚娟;PENGLEE Rachit;易欣鑫;鲍宝龙

单位：

上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室

关键词：

一氧化氮合酶;斑马鱼;基因敲除;生长激素;生长;

摘要：

为了在斑马鱼中探索诱导型一氧化氮合酶（Nos2）在生长调控中的作用,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,首次构建了可稳定遗传的nos2a缺失型(nos2a^-/-)斑马鱼家系。通过监测其生长过程发现,nos2a^-/-斑马鱼的整体生长趋势较nos2a正常型(nos2a^+/+)斑马鱼偏低,且nos2a^-/-成鱼的体型显著小于同期的nos2a^+/+斑马鱼（P<0.01）:nos2a^+/+成鱼体长（29.53±0.60） mm,nos2a^-/-成鱼体长（26.34±0.69） mm;nos2a^+/+成鱼体质量（512.80±30.75） mg,nos2a^-/-成鱼体质量（394.40±16.91） mg;而在肌纤维密度（P=0.718）及躯椎骨的横截面积上（P=0.548）两者没有显著差异。qPCR检测发现,出膜8 d时,nos2a^-/-斑马鱼的生长激素基因gh1的mRNA水平（P<0.01）及类胰岛素生长因子基因igf1的mRNA水平（P<0.001）均显著低于nos2a^+/+斑马鱼;出膜68 d时,nos2a^-/-斑马鱼的gh1（P<0.000 1）和igf1（P<0.000 1）的mRNA水平同样显著低于nos2a^+/+斑马鱼。以上结果表明,斑马鱼中nos2a的功能缺失导致鱼体生长受到抑制,而gh1及igf1 mRNA的水平下调是其潜在原因。

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