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3株H9N2亚型重组禽流感病毒生物学特性及免疫原性研究

作  者:
栾璐;倪小舒;刁小龙;刘云迎;印广浩;何海蓉
单  位:
无锡正则精准医学检验有限公司;中崇信诺生物科技泰州有限公司农业农村部农产品畜禽投入品安全评价重点实验室
关键词:
重组禽流感病毒;油乳剂灭活疫苗;免疫效力试验;

摘  要:
为评估经反向遗传技术构建的3株H9N2亚型重组禽流感(AIV)病毒A3-PR8株、AH515-PR8株和TM343-PR8株的生物学特性和免疫原性,研究将3株重组毒株在鸡胚上连续传代,3株重组毒株均能在鸡胚中稳定增殖,红细胞凝集价达到9.0 log2。与对应的亲本分离株相比,重组毒株的病毒含量(EID50)提升0.5~0.8个滴度。以3株重组毒株为抗原制备油乳剂灭活疫苗,0.2 mL/只接种21日龄SPF鸡,免疫后第7、14、21、28天采血,测定血清中H9亚型AIV的血凝抑制试验(HI)抗体效价,结果显示,免疫后28 d三种疫苗免疫鸡几何平均HI效价都可达8.0 log2,AH515-PR8株免疫组抗体效价最高达8.8 log2。免疫后28 d分别以106.0EID50的剂量进行H9N2 AIV WJ57株的攻毒保护试验,在攻毒后,AH515-PR8和TM343-PR8组免疫鸡均不发病、不死亡,排毒量有明显下降,其中AH515-PR8株免疫组排毒量最低,5 d病毒分离率为0。研究表明,经反向遗传技术构建的AH515-PR8株相较于TM343-PR8株和A3-PR8株,更具有生长繁殖能力和强免疫原性的特点,为H9N2亚型禽流感疫苗的应用和开发提供了参考。

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