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裂谷热病毒Gn1蛋白在杆状病毒系统中的表达与纯化

作  者:
孙潇;张艳芳;叶静;曹胜波;陈政
单  位:
华中农业大学动物医学院
关键词:
裂谷热病毒;Gn1蛋白;重组杆状病毒;蛋白纯化
摘  要:
采用杆状病毒表达系统表达并纯化裂谷热病毒(RVFV)Gn蛋白,并对其反应原性进行鉴定.根据GenBank公布的Gn蛋白的序列,选取其主要抗原区Gn1设计引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆至pFastBac HTB载体,构建重组转移载体,并将其转化DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选.将鉴定正确的重组杆粒转染Sf9细胞获得重组杆状病毒,经SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白正确表达后,将重组杆状病毒感染High5细胞,大量表达重组蛋白,并用镍柱亲和层析法进行纯化,最终获得纯度较高的Gn1重组蛋白.本研究为RVF新型疫苗研发及诊断试剂的研发提供了重要材料.
译  名:
Expression and Purification of Gn1 Protein of Rift Valley Fever Virus in Baculovirus System

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