当前位置: 首页 > 文章 > 烟草环斑病毒RT-PCR检测体系的优化 山东农业科学 2021 (6) 98-102
Position: Home > Articles > 烟草环斑病毒RT-PCR检测体系的优化 Shandong Agricultural Sciences 2021 (6) 98-102

烟草环斑病毒RT-PCR检测体系的优化

作  者:
郇晓雪;刘晓宇;房乐;杜传印;李广强;耿超;李向东;田延平
单  位:
枣庄市农业农村事业发展中心;山东农业大学植物保护学院;山东潍坊烟草有限责任公司
关键词:
烟草环斑病毒;检测体系;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR);优化;
摘  要:
烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是豇豆花叶病毒科(Comoviridae)线虫传多面体病毒属(Nepovirus)的代表种,是我国公布的二类进境检疫有害生物。建立特异性强、灵敏性高的检测体系是有效控制TRSV传播的技术保障。本研究在分析引物的特异性、优化退火温度及dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶浓度的基础上,建立了完善的TRSV RT-PCR检测体系。筛选出的TRSV特异性引物对为1-1F/1-1R,在退火温度为53℃、dNTPs终浓度为0.075 mmol/L、引物终浓度为0.30μmol/L、Taq DNA聚合酶终浓度为0.035 U/μL条件下检测效率最高,可从发病植物总RNA量为0.090 ng中检测到目的片段。研究结果对准确灵敏地检测TRSV具有重要意义。

相似文章

计量
文章访问数: 6
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊