当前位置: 首页 > 文章 > DF-1细胞中TLR7编码基因的敲除及其抗FAdV-4感染的天然免疫应答 畜牧与兽医 2023,55 (2) 80-90
Position: Home > Articles > Knock-out of TLR7 coding sequence in DF-1 cells and its anti-FAdV-4 innate immune response Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2023,55 (2) 80-90

DF-1细胞中TLR7编码基因的敲除及其抗FAdV-4感染的天然免疫应答

作  者:
恽君雯;陈丽;徐悦;鲍熹;冯磊;高崧
单  位:
关键词:
免疫应答;DF-1细胞;禽腺病毒4型;CRISPR/Cas9;Toll样受体7
摘  要:
旨在构建高质量的禽源细胞系,应用CRISPR/Cas9技术实现鸡胚成纤维细胞(DF-1)的Toll样受体7(TLR7)编码基因的敲除,构建稳定的细胞培养禽腺病毒4型(FAdV-4)增殖体系.采用荧光定量PCR的方法对FAdV-4感染DF-1细胞后先天性免疫信号通路中效应分子进行检测,选择转录水平显著上调的基因TLR7作为研究对象;构建sgRNA载体与Cas9表达载体共转染DF-1细胞,经绿色荧光蛋白(GFP)阳性特征分选单克隆,PCR验证及增毒试验筛选后获得TLR7编码序列敲除的DF-1-TLR7-KO#3单克隆细胞系,命名为DF-1-TLR7-KO细胞.对敲除前后DF-1细胞的天然免疫系统对FAdV-4感染的拮抗效应和病毒在不同细胞中增殖效率的差异进行了研究.结果表明:成功构建的TLR7编码序列敲除的DF-1细胞系,与原始细胞相比病毒增殖能力提高.试验对细胞的天然免疫系统与FAdV-4感染的互作机理进行了初步探索,为更好地研究宿主对病毒入侵的应答机制,提高疫苗生产效能提供了研究基础和生物材料储备.
译  名:
Knock-out of TLR7 coding sequence in DF-1 cells and its anti-FAdV-4 innate immune response

相似文章

计量
文章访问数: 15
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊