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扬子鳄α型干扰素蛋白的原核表达和纯化及其多克隆抗体的制备

作  者:
白艺兰;费荣梅
单  位:
南京农业大学农业农村部动物细菌开放实验室
关键词:
IFN-α;扬子鳄;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体
摘  要:
为了进一步研究扬子鳄IFN-α,构建原核表达载体pET32a-IFN,导入大肠杆菌表达系统后诱导表达,并纯化靶蛋白.使用纯化重组蛋白作为抗原,加入佐剂乳化后免疫3只雌性的6周龄BALB/c小鼠,免疫后第35天对小鼠采血分离血清并测定效价.结果显示,成功构建原核表达载体pET32a-IFN,Western-blot鉴定显示,扬子鳄IFN-α重组蛋白成功表达,大小与预期相符,约为43 ku;免疫后的1号和2号小鼠所产生的多克隆抗体效价均为1∶ 51 200,3号小鼠所产生的多克隆抗体效价为1∶ 25 600,具有良好的特异性,这为后续扬子鳄IFN-α抗病毒的研究奠定了基础.
译  名:
Prokaryotic expression,purfication and preparation of polyclonal antibody of Chinese alligator IFN-α

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