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表没食子儿茶素没食子酸酯对张氏肝细胞DNA修复基因表达的影响

作  者:
黄秀华;张丹;杨足君;任正隆
单  位:
电子科技大学生命科学与技术学院分子生物学实验室;成都恩威集团四川恩威中医药研究开发有限公司药理室
关键词:
EGCG;卡莫司汀;DNA损伤;彗星实验;RT-PCR;DNA修复基因;mgmt;alkb
摘  要:
采用MTT法、Comet assay(彗星实验)和RT-PCR法研究了表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对DNA损伤剂卡莫司汀作用后张氏肝细胞的DNA损伤及相关修复基因表达的影响。结果表明:EGCG能阻止卡莫司汀所致张氏肝细胞的生长抑制,卡莫司汀单用对张氏肝细胞的IC_(50)为43.31μg/mL,当用25μg/mL和50μg/mL.的EGCG与卡莫司汀联用时,对张氏肝细胞的IC_(50)分别提高至52.46μg/mL和46.65μg/mL。彗星分析结果表明,EGCG还能减小卡莫司汀引起的张氏肝细胞DNA损伤,彗星Olive尾矩值由单用时的9.07+5.48降为联用时的6.02±2.46。EGCG还能使卡莫司汀所致张氏肝细胞的DNA修复基因mgmt和alkb的表达下降得到回升,卡莫司汀(20μg/mL)处理张氏肝细胞24h后,mgmt和alkb的mRNA水平(与外参β-actin的比值)比未处理组明显下降(分别由0.451±0.041和0.356±0.120下降至O.323±0.046和0.046±0.017,p<0.05或p<0.01),当EGCG与卡莫司汀联合处理24h后,二者的mRNA水平基本恢复到正常(p>0.05),与外参β-actin的比值分别为0.451±0.041和0.451±0.041。说明EGCG能保护卡莫司汀对正常肝细胞的DNA损伤,因为它能逆转卡莫司汀所致正常肝细胞内DNA修复酶基因mgmt和alkb的表达下降。

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