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Position: Home > Articles > Preparation of RNA interference transfection on the Hsc70 gene in H9c2 myocardial cells Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2017 (8) 48-52

RNA干扰大鼠H9c2心肌细胞Hsc70基因条件筛选

作  者:
陈洪博;段滇宁;鲍恩东;杨小燕
单  位:
南京农业大学动物医学院;福建龙岩学院生命科学学院
关键词:
心肌细胞;RNA干扰;结构型热休克蛋白70
摘  要:
为了研究H9c2心肌细胞RNA干扰的转染条件,筛选结构型热休克蛋白70(Hsc70)干扰序列,采用流式细胞仪和Western blot方法,研究不同剂量比例荧光标记的siRNA(FAM-siRNA)和不同浓度脂质体2000(Lipofectamine 2000)对转染效率的影响,进一步筛选Hsc70 siRNA的最佳沉默序列。结果显示:流式细胞仪试验得出的最佳转染条件为80 nmol/L FAM-siRNA+1.5μL Lipofectamine 2000;Western blot结果表明,Oligo 2、Oligo 3和Oligo 4组中的Hsc70蛋白表达极显著降低(P<0.01),其中Oligo 3组的沉默效率最高;转染后48 h收获细胞为最佳转染时间。结果表明:80 nmol/L FAM-siRNA+1.5μL Lipofectamine 2000为最佳转染条件,以Oligo 3为最佳RNA干扰靶基因。
译  名:
Preparation of RNA interference transfection on the Hsc70 gene in H9c2 myocardial cells

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