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Position: Home > Articles > Studies on avian endogenous retrovirus ALVE1 env transcripts specifically targeted by miR-155 in vitro Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2016,48 (5) 7-11

miR-155体外特异性靶向鸡内源性反转录病毒ALVE1 env转录物的研究

作  者：
朱文奇;胡序明;陈世豪;刘洋洋;孙振;耿拓宇;宋成义;高波;崔恒宓
单  位：
扬州大学表观遗传学及表观基因组学研究所
关键词：
miR-155;靶位点;鸡内源性反转录病毒;ALVE1;env
摘  要：
通过生物信息学方法,发现了鸡内源性反转录病毒禽白血病E1(ALVE1)的env转录物存在gga-miR-155作用位点(AGCATTA),并在体外验证其靶位点的活性。将鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组中扩增的ALVE1 env转录物构建至荧光素酶报告载体pmir GLO,获得重组质粒pmirGLO-ALVE1-ENV-WT(野生型),并利用重叠PCR将其miR-155作用位点AGCATTA突变为ATTCAAA,然后构建重组质粒pmir GLO-ALVE1-ENV-MU(突变型),同时将gga-miR-155前体序列构建至pc DNA3.1载体,获得重组质粒pc DNA3.1-gga-miR-155,将这些质粒共转染至DF-1细胞中,48 h后收集细胞并检测荧光素酶活性。结果发现:野生组能显著下调pmir GLO-ALVE1-ENV-WT荧光素酶活性,而对照组无显著改变;对照组和突变组均未能改变pmir GLO-ALVE1-ENV-MU荧光素酶活性。本研究证实gga-miR-155可直接靶向ALVE1 env转录物,为鸡内源性反转录病毒的调控机制提供了新的启示。
译  名：
Studies on avian endogenous retrovirus ALVE1 env transcripts specifically targeted by miR-155 in vitro

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