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1株假单胞菌oprD基因缺失和回补载体的构建

作  者:
朱艳容;刘志新;杨靖;韩韵;陈果;徐祥
单  位:
湖北医药学院基础医学院;长江水利委员会水文局汉江水文水资源勘测局
关键词:
假单胞菌;毒力因子;基因敲除;基因回补
摘  要:
[目的]构建假单胞菌毒性基因(oprD)缺失突变株,为进一步探讨其编码的毒力因子功能奠定基础。[方法]利用pEX18Gm质粒作为基因敲除的载体,构建假单胞菌oprD基因重组自杀质粒,通过同源重组并激活自杀基因方式,筛选到目的基因缺失的突变株,再利用pBBR1MCS-2质粒作为目的基因回补的载体,构建回补载体。[结果]同源重组后,经过庆大霉素和氯霉素双抗平板、蔗糖平板筛选和PCR鉴定,成功获得了oprD基因缺失突变株,类似操作获得了回补菌株。[结论]基因缺失突变株的成功构建可为下一步的毒性机理研究奠定基础。
译  名:
Construction of oprD Gene Deletion and Complement Vector of Pseudomonas sp.

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