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Position: Home > Articles > CONSTRUCTION,TRANSFORMATION,AND SELF-ACTIVITY RESEARCH OF BAIT RECOMBINED VECTOR CARRYING VP37 GENE IN YEAST TWO-HYBRID SYSTEM Transactions of Oceanology and Limnology 2010 (4) 129-136

对虾白斑综合症病毒VP37基因诱饵重组载体的构建、转化与自激活作用检测

作  者:
张莉
单  位:
青岛农业大学生命科学学院微生物学教研室
关键词:
WSSV;黏附蛋白;酵母双杂交系统;重组载体
摘  要:
把对虾白斑综合症病毒(White syndrome spot virus,WSSV)黏附蛋白VP37的基因C末端截去102个碱基后设计了一对引物,通过PCR扩增出目的片段。用其构建酵母双杂交诱饵载体,并检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用和自激活活性。结果获得截短的VP37基因片段,并成功克隆入酵母双杂交系统PGBKT7 DNA-BD载体中,测序结果表明序列完全正确。把重组载体转化酵母菌AH109并检测自激活作用。结果显示表达的融合蛋白没有激活ADE2,HIS3这2个报告基因,但激活了MEL1,该融合蛋白对酵母菌AH109无毒性。可利用其它2种报告基因将其应用于酵母双杂交系统,筛选cDNA文库中与之相互作用的基因。
译  名:
CONSTRUCTION,TRANSFORMATION,AND SELF-ACTIVITY RESEARCH OF BAIT RECOMBINED VECTOR CARRYING VP37 GENE IN YEAST TWO-HYBRID SYSTEM

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