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猪IL-15 cDNA真核表达载体的构建、表达及其免疫佐剂效应

作  者:
何谦;陈钜豪;房红莹;卢俊鹏;张欣;崔敏;曾小娜;刘健;罗满林
单  位:
广州市工商行政管理局白云分局;暨南大学生命与健康工程研究院;华南农业大学兽医学院动物传染病实验室
关键词:
猪IL-15;真核表达;瞬时表达;佐剂疫苗;中和抗体水平
摘  要:
参考GenBank发表猪IL-15mRNA序列设计引物,用RT-PCR方法扩增猪IL-15cDNA,并克隆到pMD18-T载体中,通过PCR、酶切和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcD-NA-pIL-15。在脂质体介导下,重组质粒pcDNA-pIL-15转染AD-293细胞。以鼠抗猪IL-15为一抗,用间接免疫荧光分析表明猪IL-15基因均在AD-293细胞中成功进行了瞬时表达。小鼠免疫试验表明,pcDNA-pIL-15作为免疫佐剂,能够有效提高小鼠的脾T细胞增殖,加强pcDNA-ORF2(PCV2)质粒免疫过程中的特异性中和抗体的产生,为进一步研制猪IL-15基因佐剂疫苗及进行临床实验奠定基础。
译  名:
Construction and expression of porcine interleukin-15 cDNA eukaryotic expression vector and its enhancing of immunity as immunoadjuvants

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