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丝腺特异表达hBPI23转基因蚕的制作和表达分析

作  者:
冉冬旭;欧瑶;刘荣鹏;肖海梅;徐汉福
单  位:
家蚕基因组生物学国家重点实验室西南大学生物技术学院
关键词:
家蚕;转基因;杀菌/通透性增加蛋白;丝腺;表达
摘  要:
杀菌/通透性增加蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)最先是在人类中性粒细胞中发现的一种阳离子抗菌蛋白,具有抗革兰氏阴性菌和中和内毒素等作用.研究表明,人BPI蛋白的N末端区(hBPI 23,分子量为23 kDa)具有天然BPI的全部生物活性.为探索利用BPI提高蚕丝抗菌性能的可行性,本研究首先构建了以家蚕后部丝腺特异启动子fibH为调控元件、hBPI23为靶标的转基因表达载体,进而通过显微注射和荧光筛选,制作获得了携带hBPI23的转基因系H-hBPI23.进一步检测显示:H-hBPI23的基因组整合位点位于家蚕第23号染色体上;在H-hBPI235龄幼虫后部丝腺中,hBPI23的转录表达在整个5龄期呈上升趋势,5龄第6 d(吐丝前1 d)达到表达高峰,其表达模式与内源丝素蛋白基因类似.本研究为下一步开展H-hBPI23蚕丝的抗菌性能研究打下了初步基础.

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