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加工番茄'新番72号'遗传转化体系的建立

作  者:
刘江娜;张小伟;张西英;李荣霞;薛丽萍;张爱萍
单  位:
新疆生产建设兵团第六师农业科学研究所
关键词:
加工番茄;‘新番72号’;农杆菌介导法;遗传转化;
摘  要:
本研究以加工番茄‘新番72号’为试验材料,通过农杆菌介导法,将含有双sg RNA靶位点SlACS2基因编辑植物表达载体转入‘新番72号’中,对农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养天数、筛选剂浓度等因子进行分析优化。结果表明:以OD600=0.7的菌液,侵染‘新番72号’子叶15 min,共培养2 d后,接种至20 mg/L Kan筛选培养基上培养15 d后,转至40 mg/L Kan培养20 d,最终再转至60 mg/L Kan培养20 d,检测到抗性愈伤诱导率为54.6%,抗性不定芽分化率为24.67%。将分化得到的不定芽接种到生根培养基,获得抗性再生植株31株,经PCR检测,其中22株扩增得到大小为841 bp的目的条带,阳性率为70.9%,初步推测SlACS2敲除载体已整合到加工番茄基因组中。本研究为利用CRISPR-Cas9基因编辑技术改良加工番茄农艺性状、培育无转基因序列的新种质提供技术参考。

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