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竹叶黄酮对热应激诱导奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用

作  者:
李建凤;赵佳桢;沈义媛;关淑文;韩思雨;熊本海;王梦;楚康康;方洛云;童津津;蒋林树
单  位:
北京农学院动物科学技术学院奶牛营养学北京市重点实验室;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;首农集团
关键词:
竹叶黄酮;热应激;细胞凋亡;Nrf2信号通路;奶牛乳腺上皮细胞
摘  要:
本研究以竹叶黄酮(BLF)为添加剂,探究其对热应激诱导奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)损伤的保护作用.将不添加BLF、37℃处理的BMECs设为对照组,不添加BLF、42℃处理的BMECs设为热应激组,以添加不同浓度(1、5、10μg/mL)的BLF、42℃处理的BMECs设为试验组,每组3个重复.应用乳酸脱氢酶(LDH)法检测BLF对热应激诱导BMECs氧化损伤的影响以及流式细胞仪和试剂盒法检测BLF对热应激诱导BMECs氧化损伤后抗氧化指标的影响,并应用实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因以及核因子红细胞相关因子2(Nrf2)信号通路中相关基因表达量的变化.结果表明:与对照组相比,热应激组BMECs活性显著下降(P<0.05),而添加1、5、10μg/mL的BLF与热应激损伤的BMECs共培养12 h后,极显著降低了细胞毒性、早期凋亡率和总凋亡率(P<0.01),极显著降低了BMECs的线粒体膜电位(MMP)水平(P<0.01),极显著抑制了细胞内活性氧(ROS)的产生(P<0.01);与热应激组相比,BLF极显著提高了总超氧化物歧化酶(T?SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH?Px)活性(P<0.01),而极显著降低了丙二醛(MDA)含量(P<0.01);实时荧光定量PCR结果表明,与热应激组相比,BLF极显著降低了热休克转录因子1(HSF1)、热休克蛋白70(HSP70)和热休克蛋白90(HSP90)、环氧化酶-2(COX?2)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase?3)的mRNA相对表达量(P<0.01),极显著上调了Nrf2、血红素加氧酶-1(HO?1)、半胱氨酸摄取转运蛋白(xCT)、硫氧还蛋白还原1(Txnrd 1)和NADPH-醌氧化还原酶1(NQO 1)的mRNA相对表达量(P<0.01).综上所述,BLF通过调控Nrf2信号通路中关键基因缓解热应激对BMECs的氧化损伤,且5μg/mL BLF对热应激诱导BMECs氧化损伤的保护效果最好.
译  名:
Protective Effects of Bamboo Leaf Flavonoids on Oxidative Damage of Bovine Mammary Epithelial Cells Induced by Heat Stress

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