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FOOD SCIENCE
2023,44
(20)
100-106
植物乳杆菌素LPL-1的异源表达及理化性质分析
作 者:
王玉;王瑶;李平兰
单 位:
;中国农业大学食品科学与营养工程学院
关键词:
Ⅱa类乳酸菌细菌素;植物乳杆菌素LPL-1;异源表达;包涵体;CRISPR/Cas9
摘 要:
为在大肠杆菌中可溶表达具有生物活性的Ⅱa类细菌素,以植物乳杆菌素LPL-1为研究对象,将植物乳杆菌素LPL-1的表达基因克隆至阿拉伯糖启动子下,C-端与His-tag序列融合表达,以单核细胞性李斯特菌ATCC 54002为指示菌,鉴定重组细菌素的活性.通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对大肠杆菌BW25331基因组进行编辑,突变过氧化物酶基因(ahpC),敲除硫氧还蛋白还原酶(trxB)和谷胱甘肽还原酶(gor)基因,成功构建了适宜Ⅱa类细菌素表达的细胞工厂E coil(△trxB+△gor+ahpCM).表达产物经亲和层析纯化后,对其理化性质进行分析,证明重组细菌素具有热稳定性(60~100 ℃)、酸碱稳定性(pH 2~11)、表面活性剂稳定性.本研究实现了植物乳杆菌素LPL-1在大肠杆菌中的活性表达,重组表达的细菌素具有稳定的理化性质,在食品行业具有广泛的应用潜力.
译 名:
Heterologous Expression and Physicochemical Properties of Plantaricin LPL-1
关键词:
class Ⅱa bacteriocins%plantaricin LPL-1%heterologous expression%inclusion body%CRISPR/Cas9
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