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猪肺泡巨噬细胞的分离、纯化和冷冻保存研究

作  者:
孟春花;曹少先;苏磊;贺强;王慧利;丰秀静;张庆晓;刘铁铮
单  位:
江苏省农业科学院畜牧研究所
关键词:
肺泡巨噬细胞;纯化;冷冻保存;吞噬;猪
摘  要:
通过冷PBS气管灌洗法分离猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM),优化了PAM的纯化和冷冻保存方法,并进行了PAM纯度鉴定、细胞吞噬功能和存活率检测。结果表明:RPMI-1640培养液比DMEM培养液更适于PAM的培养和冷冻保存;巨噬细胞抗体MAC387免疫荧光检测表明,贴壁2h后更换培养液获得的PAM纯度最高(P<0.05);用70%RPMI-1640+20%新生牛血清+10%DMSO的体系冷冻保存细胞密度为1×107个/mL的PAM可获得高达98.09%的存活率,冻存前后PAM的墨汁吞噬率无显著差异(P>0.05)。

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