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环形泰勒虫转运蛋白实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作  者:
史康妍;李志;曹天行;李霞;关贵全;殷宏;罗建勋;刘军龙;赵洪喜
单  位:
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室;宁夏大学农学院
关键词:
环形泰勒虫;环形泰勒虫转运蛋白;实时荧光定量PCR;
摘  要:
根据GenBank中公布的环形泰勒虫转运蛋白(Theileria annulata cargo protein)基因序列,设计1对特异性引物,用于建立环形泰勒虫转运蛋白TB Green实时荧光定量PCR检测方法。结果显示:本方法对环形泰勒虫具有特异性,与中华泰勒虫、东方泰勒虫、牛巴贝斯虫和双芽巴贝斯虫无交叉反应;本方法的最低检测限为10.4 copies;组内和组间的变异系数均小于5%,具有较好的稳定性。对来自10个省(自治区)的766份样品进行检测,发现该环形泰勒虫实时荧光定量PCR方法的检测敏感性高于普通PCR的。本研究中建立的环形泰勒虫转运蛋白实时荧光定量PCR方法具有特异性强、敏感性高、稳定性好的特点,为检测环形泰勒虫病提供了一种快速、有效的诊断方法。

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