付文卓;张磊;乔芳芳;赵焕英

首都医科大学;宾夕法尼亚大学兽医学院;内布拉斯加大学医学研究中心

FOXO3基因;凋亡基因;氧化应激;神经退行性疾病;细胞死亡;BIM基因;

为了研究在小鼠神经元细胞氧化应激模型中FOXO3基因及其下游凋亡基因BIM的表达情况,并进一步探讨FOXO3基因在神经退行性疾病中的临床意义,试验利用H₂O₂构建神经元细胞氧化应激模型,通过Western-blot分析和细胞活力检测验证该模型,采用实时荧光定量PCR方法检测FOXO3基因及其下游凋亡基因BIM的相对表达量,利用Si-RNA干扰FOXO3基因及其蛋白的表达,并再次利用实时荧光定量PCR和细胞活力检测方法分析FOXO3基因表达量与细胞死亡的关系。结果表明:与正常神经元细胞相比,经H₂O₂处理的神经元细胞中Cleaved-Caspase3表达量明显升高,细胞活力显著降低（P<0.05）,FOXO3基因（P<0.05）及其凋亡基因BIM（P<0.01）相对表达量上升,即成功构建出神经元细胞氧化应激模型;用Si-RNA技术进行干扰后,FOXO3基因及其蛋白的相对表达量明显下降,与仅用H₂O₂处理的神经元细胞相比,凋亡基因BIM的相对表达量显著下降（P<0.05）,神经元细胞活力显著增加（P<0.05）。说明FOXO3基因及其下游凋亡基因BIM的表达在神经元细胞氧化诱导死亡过程中有重要的促进作用。