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鸡白介素-18与鸡α-干扰素融合蛋白克隆及其原核表达载体的构建

作  者:
项黎丽;杨红星
单  位:
河南省济源市畜产品质量监测检验中心;郑州新天昊生物科技有限公司
关键词:
鸡白细胞介素18;鸡干扰素;串连表达;重叠延伸技术(SOE);原核表达载体
摘  要:
为了研制新型细胞因子制剂,将鸡白细胞介素18 (ChIL-18)基因和鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因通过多肽氨基酸接头(Linker)连接在一起构成mChIL-18/mChIFN-α融合蛋白基因,并构建原核重组表达载体,以期表达具有生物学活性的融合蛋白.以mChIL-18 cDNA与mChIFN-αDNA为模板,通过PCR及PCR重叠延伸技术(SOE)得到mChIL-18/mChIFN-α融合DNA.将回收的DNA克隆于pGEM-T Easy载体,并对其进行了测序.测序结果表明获得了阅读框完整、连接部位正确的mChIL-18/mChIFN-α融合分子DNA.将所克隆的目的片断亚克隆到原核表达载体pQE30,构建重组质粒pQE30-mChIL-18/mChIFN-α(.)pQE30-mChIL-18/mChIFN-α的成功构建为研制开发新一代的多功能、多靶点的细胞因子制剂奠定了基础.

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