中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会
Agricultural Information Institute of CAAS China Association of Agricultural Science Societies
En
Ch
中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会 主办

AI检索

订阅

返回顶部
当前位置: 首页 > 文章 > 马铃薯卷叶病毒CP基因的突变及其原核表达 东北农业大学学报 2010,41 (8) 11-15
Position: Home > Articles > Mutation and prokaryotic expression of potato leafroll virus coat protein gene Journal of Northeast Agricultural University 2010,41 (8) 11-15

马铃薯卷叶病毒CP基因的突变及其原核表达

作  者：
张建建;隋炯明;盖树鹏;宋希云;郭宝太
单  位：
青岛农业大学生命科学学院
关键词：
马铃薯卷叶病毒;CP基因;密码子突变;原核表达
摘  要：
通过人工合成DNA的方法,对马铃薯卷叶病毒外壳蛋白(CP)基因第52~177核苷酸(126 bp)这段序列进行了突变,将其中12个AGA、AGG、CGA等精氨酸稀有密码子变成了原核高效表达的同义密码子CGT与CGC,将另外两个AGA精氨酸密码子变成了错义密码.构建了突变基因的原核表达载体pBAD-LRCP2,Bsp1407 Ⅰ与Mss Ⅰ酶切及DNA测序结果表明,基因突变符合要求,表达载体的构建正确.在37℃,大肠杆菌工程株TOP10(pBAD-LRCP2)用0.2%L-阿拉伯糖诱导培养4 h,SDS-PAGE显示蛋白图谱上有一条36 ku的诱导表达的融合蛋白条带,结果表明突变基因在PBAD启动子驱动下在大肠杆菌中实现了表达.
译  名：
Mutation and prokaryotic expression of potato leafroll virus coat protein gene
关键词：
potato leafrollvirus%CP gene%codon mutation%prokaryotic expression
摘  要：
The 52-177 nucleotides (126 bp) ofpotato leafrollvirus coatprotein (CP) gene were mutated by artificial synthesis of DNA. Twelve rare arginine codons of AGA, AGG, and CGA were replaced by synonymous codons of CGT and CGC with high-level prokaryotic expression, and othertwo arginine codons of AGA were changed into missense codons. The prokaryotic expression vector of the mutant gene named pBAD-LRCP2 was constructed. Digestion of Bsp1407 Ⅰ and Mss Ⅰand DNA sequencing confirmed the accuracies of gene mutation and expression vector construction. The engineered strain TOP10 (pBAD- LRCP2) of Escherichia coli was induced with 0.2%L-arabinose at 37 ℃ for4 h, a 36 ku induction expression band of fusion protein was found in the SDS-PAGE pattern. The result indicated that prokaryotic expression ofthe mutantgene was realized underthe drive ofPBADpromoter.

相似文章

导出引用
计量
文章访问数: 14
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊

友情链接Friendly link
农业信息研究所Agricultural information institute 农业智能知识服务平台Agricultural intelligent knowledge service platform 农业学术服务平台Agricultural Knowledge Service System 中国知网CNKI 维普网VIP 万方WANFANG DATA
联系我们Contact us

电话Tell：010-82109652-808

邮箱E-mail：agrijournal@caas.cn

服务Service
关于我们About us 意见建议Opinions and suggest
版权说明Copyright
单位：中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会 © 2017中国农业科学院农业信息研究所 ICP备案号：京ICP备09089781号-46