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PLRV 45KD蛋白基因植物转化载体的构建

作  者:
邸宏;田兴亚
单  位:
东北农业大学农学院
关键词:
马铃薯卷叶病毒;蛋白基因;PLRV;56KD;植物转化;载体构建;二次连接法
摘  要:
为培育转基因抗马铃薯卷叶病毒的新材料,采用二次连接法将存在于克隆载体pLR56中的马铃薯卷叶病毒56KD蛋白基因及3′端非编码区构建对双元载体系统的中间表达载体质粒pROK Ⅱ中,采用三亲融合法和直接导入法转化根瘤农杆菌LBA4404.PCR法检测,实验表明,二次连接法效果优于一次连接法,两种连接法对比,二次连接法更适用于大分子质粒的重组.直接导入法比三亲融合法更简便,二者转化效率没有显著差异.实验构建完成马铃薯卷叶病毒45KD蛋白基因及3′端非编码植物转化载体,建立了高效、简便的植物转化载体的构建方法.

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