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马铃薯卷叶病毒衣壳蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

作  者:
王韬远;张春雨;王忠伟;李闯;张胜利;李建平;李小宇;王永志
单  位:
吉林省农业科学院;吉林省蔬菜花卉科学研究院;芜湖职业技术学院
关键词:
马铃薯卷叶病毒;衣壳蛋白;原核表达;多克隆抗体;
摘  要:
本研究克隆马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)衣壳蛋白(Coat Protein, CP)基因,改造其密码子,使其偏好原核表达,构建pCzn1-PLRV CP重组表达载体,通过大肠杆菌表达纯化,经Western Blot方法鉴定为PLRV CP蛋白,纯化后的蛋白免疫日本大耳兔,成功制备PLRV CP蛋白多克隆抗体,识别重组蛋白效价为128 000倍,识别PLRV叶片的效价为32 000倍,经Western Blot方法分析,其特异性良好。本研究为PLRV检测方法的建立及脱毒种薯的检测提供了必需的生物材料。

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