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Position: Home > Articles > Optimization of extraction conditions of limonene converting-enzyme and study on enzymatic properties Journal of Huazhong Agricultural University 2020,39 (4) 105-113

柠檬烯转化酶的提取条件优化及酶学性质研究

作  者:
张莹莹;李志;张璐璐;李晓;范刚;彭芷芊;任婧楠;潘思轶
单  位:
华中农业大学食品科学技术学院/环境食品学教育部重点实验室
关键词:
指状青霉;柠檬烯;提取条件;生物转化;柠檬烯转化酶;响应面优化;酶活性
摘  要:
以指状青霉(Penicillium digitatum)DSM62840为研究对象,采用高压细胞破碎法破碎菌体,对其转化柠檬烯生成α-松油醇过程中的相关酶的提取条件进行优化.以柠檬烯转化酶活性为指标,在单因素试验的基础上结合响应面试验法,确定最佳提取条件;同时,对柠檬烯转化酶的酶学性质进行了初步探索.结果显示,最佳提取条件为:破碎压力100 MPa、破碎6次、液料比15:1(mL/g),在此条件下,α-松油醇的质量浓度为855.75 mg/L,酶活力达到71.31 U.柠檬烯转化酶最佳转化时间为4 h,在磷酸盐缓冲液中获得的酶活性最高;该酶可能为细胞色素P450,且不同的金属离子对酶活性的影响不同:Fe2+对酶有轻微的抑制作用,而Ca2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+、Co2+、Ba2+、Na+、K+、Fe3+、Ni2+则对酶有不同程度的激活作用.粗酶液SDS-PAGE电泳结果表明优化后的提取工艺效果较好.
译  名:
Optimization of extraction conditions of limonene converting-enzyme and study on enzymatic properties

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