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4种肠道致病菌的多重荧光定量PCR快速检测方法的建立

作  者:
赵冉;陈琼;孔繁德;徐淑菲
单  位:
厦门出入境检验检疫局;厦门市农产品质量安全检验测试中心
关键词:
多重荧光定量PCR;沙门菌;弗氏枸橼酸杆菌;奇异变形杆菌;迟缓爱德华菌
摘  要:
根据沙门菌的invA基因、弗氏枸橼酸杆菌的ldh基因、奇异变形杆菌的ureR基因和迟缓爱德华菌的fimA基因的保守序列,分别设计合成4对特异性引物和4个Taqman探针,通过对PCR反应体系的优化,并对该方法的特异性、敏感性进行评估,建立了一种能同时检测沙门菌、弗氏枸橼酸杆菌、奇异变形杆菌、迟缓爱德华菌的四重荧光定量PCR快速检测方法。该方法可特异性的检测到4种目标菌株的单一模版及混合模板,未发现不同成分间的交叉反应,最低检出限均为103cfu/mL;对22种非目标病原菌进行检测均为阴性。本研究建立的四重荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强,可用于上述4种致病菌的同时快速检测。

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