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当前位置: 首页 > 文章 > 野生稻种子胚乳蛋白的提取及双向电泳条件的确立 西南农业学报 2008,21 (2) 313-316
Position: Home > Articles > Establishment of extraction method and two-dimensional electrophoresis conditions for endosperm proteome analysis of wild rice seed Southwest China Journal of Agricultural Sciences 2008,21 (2) 313-316

野生稻种子胚乳蛋白的提取及双向电泳条件的确立

作  者：
孙一丁;章成;黄兴奇;王玲仙;程在全
单  位：
云南大学生命科学学院;云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
关键词：
野生稻;胚乳蛋白;二向电泳
摘  要：
为揭示野生稻与栽培稻之间种子贮存的差异,建立了一套适合于水稻胚乳蛋白双向电泳分析的技术。探讨了种子胚乳蛋白的提取、纯化以及双向电泳的一些关键技术。结果表明,直接使用提取液(7M尿素,2M硫脲,4%3-[3-(胆酰氨丙基)二甲铵基]丙磺酸内盐,0.5%等电聚焦缓冲液3-10,40mM二硫苏糖醇)对单位米粉进行抽提后,直接离心上样,可以防止样品蛋白的丢失,保证样品蛋白的完整性,而在等电聚焦时,延长除盐时间,可以有效地减少凝胶中的横纹和竖纹,通过二向电泳分析结果,我们从合系41种子胚乳中得到蛋白斑点数约为310个,从滇超9号种子胚乳中得到蛋白点数约为327个,普通野生稻中得到蛋白点数约为331个,药用野生稻种子胚乳中得到蛋白点数约为346个,疣粒野生稻种子胚乳中得到蛋白点数约为278个。
译  名：
Establishment of extraction method and two-dimensional electrophoresis conditions for endosperm proteome analysis of wild rice seed
作  者：
SUN Yi-ding1,3,ZHANG Cheng2,HUANG Xing-qi1,WANG Ling-xian1,CHENG Zai-quan1(1.Biotechnology and Genetic Germplasm Institute of Yunnan Academy of Agricultural Sciences,Yunnan Kunming 650223,China;2. College of Life Science,Yunnan University,Yunnan Kunming 650091,China;3. College of Agronomy and Biotechnology,Yunnan Agricultural University,Yunnan Kunming 650201,China)
关键词：
rice;endosperm protein;2-D electrophoresis
摘  要：
In order to research the difference of endosperm proteome among three species wild rice and two species cultural rice. One serial of 2-Delectrophoresis which be suitable to endosperm proteins of rice seed was set up.It was discussed on the extraction,purification of the endosperm proteins and some key technologies of 2-D electrophoresis.The results were showed that,it can get high quality protein plate using the extract buffer (7M Urea,2Mthiourea,4 %CHAPS,0.5 %IPG buffer 3 %10,40 mMDTT)and extending the time of IEF to 2000v*h. After contained with CBB R %250,about 310 protein spots of HeXi41,327 protein spots of DianChao 9,331 protein spots of O.rufupogon,346 protein spots of O. officinalis,278 protein spots of O. meyeriana were found.

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