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富硒乳酸菌对AFB1导致的CSIEC氧化损伤的影响

作  者：
李元辉;傅春妮;李鹏程;彭玉凯;李留安;张建斌;秦顺义
单  位：
天津农学院动物科学与动物医学学院
关键词：
细胞氧化损伤;富硒乳酸菌;黄曲霉毒素;鸡小肠上皮细胞;PI3K/Akt/mTOR信号通路;
摘  要：
为了探究黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）诱导鸡小肠上皮细胞（chicken small intestinal epithelial cells, CSIEC）氧化损伤的作用机制以及富硒乳酸菌对该过程的缓解作用,试验将体外培养的CSIEC分为5组,即C组（空白细胞组）、AFB1组（AFB1 300μmol/L）、AFB1+0.01Se组（AFB1 300μmol/L+0.01μmol/L富硒乳酸菌,以Se计）、AFB1+0.05Se组（AFB1 300μmol/L+0.05μmol/L富硒乳酸菌,以Se计）、AFB1+0.1Se组（AFB1 300μmol/L+0.1μmol/L富硒乳酸菌,以Se计）,待细胞贴壁面积达到60%～70%后,AFB1+0.01Se组、AFB1+0.05Se组和AFB1+0.1Se组更换为含富硒乳酸菌（经高压灭菌处理）的完全培养基,浓度分别为0.01,0.05,0.1μmol/L（以Se计）。8 h后向除C组外的各组添加AFB1溶液,使其终浓度为300μmol/L,继续培养24 h后终止培养。采用ELISA法分别测定各组CSIEC的抗氧化酶总抗氧化能力（T-AOC）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）浓度,以及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6和IL-10水平;通过Western-blot检测磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和核因子（NF）-κB p65的蛋白表达量。结果表明:AFB1能诱导CSIEC T-AOC和GSH-Px、CAT活性及IL-10水平的降低,MDA水平的升高,而富硒乳酸菌能够颉颃这种作用,提高TNF-α和SOD的分泌水平,通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路和NF-κB p65蛋白表达水平来发挥其抑制AFB1诱导的细胞氧化损伤的作用。说明富硒乳酸菌能够缓解AFB1诱导的CSIEC的氧化损伤。

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