中国农业期刊集成服务平台

当前位置: 首页 > 文章 > 表达绿色荧光蛋白重组单核细胞增多性李斯特菌的构建(英文) 浙江大学学报(农业与生命科学版) 2005,31 (5) 638-644

Position: Home > Articles > Construction of the recombinantListeria monocytogenes mutant expressing green fluorescent protein Journal of Zhejiang University (Agriculture and Life Sciences) 2005,31 (5) 638-644

表达绿色荧光蛋白重组单核细胞增多性李斯特菌的构建(英文)

作者：

柯春林;宋厚辉;江玲丽;张桂芝;方维焕

单位：

浙江省动物预防医学重点实验室;中国科学院微生物研究所;浙江省动物预防医学重点实验室浙江杭州310029;浙江大学动物预防医学研究所

关键词：

单核细胞增多性李斯特菌;同源重组;绿色荧光蛋白;外源基因表达

摘要：

将编码绿色荧光蛋白(GFP)的基因融合到单核细胞增多性李斯特菌actA基因启动子和信号肽下游,应用同源重组技术构建了含gfp的重组李斯特菌突变株.PCR扩增及其产物的酶切鉴定均证实目的基因gfp融合到李斯特菌基因组中.荧光显微镜下可见重组菌体发绿色荧光.SDS-PAGE电泳和免疫印迹结果显示重组李斯特菌表达的GFP分子量约为28 kD,与预计的分子量大小一致.重组菌对鸡胚和小鼠的毒力以及对体外培养细胞的侵袭力均低于野生型李斯特菌.该重组菌可用于研究李斯特菌的致病机理和食品加工过程中微生物污染控制的指示性细菌.

译名：

Construction of the recombinantListeria monocytogenes mutant expressing green fluorescent protein

作者：

KE Chun-lin1,SONG Hou-hui2,JIANG Ling-li1,ZHANG Gui-zhi1,FANG Wei-huan1(1.Institute of PreventiveVeterinary Medicine,Zhejiang University,and Zhejiang Provincial Key Laboratory of Preventive VeterinaryMedicine,Hangzhou 310029,China;2.Institute of Microbiology,Chinese Academy of Sciences,Beijing100080,China)

关键词：

Listeria monocytogenes;homologous recombination;green fluorescent protein;heterologousgene expression

摘要：

ArecombinantListeria monocyogenesmutant expressing greenfluorescent protein(GFP) genewas constructed by homologous recombination.The target genegfpwas fused to theactAgene fragmentdownstreamof its promoter and signal sequence.PCRamplification and restriction digestion of the PCRproduct confirmed the insertional fusion.The reporter gene was expressed as shown by fluorescentmicroscopy and SDS-PAGE/western blotting.The recombinant strain exhibited reduced invasiveness tothein vitrocultured cells as well as decreased virulence to the chicken embryos and mice.The strain haspotential applications in microbe-host interaction studies in the medical or veterinary medical fields andinfood microbiological studies.

相似文章

单核细胞增多性李斯特菌p60蛋白表达条件的优化 [吕添, 曹正茂, 武海涛, 王小红] 食品科学 2010,31 (23) 160-163
应用两对引物PCR检测速冻食品中单核细胞增多性李斯特菌 [陈倩, 付萍] 食品科学 1998,19 (12) 40-41
单核细胞增多性李斯特菌LMO1847基因在不同应激条件下的表达 [田国明, 李肖梁, 陈建舜, 陈雪燕, 方维焕] 畜牧与兽医 2007,39 (7) 7-11
冷冻食品中单核细胞增多性李斯特菌的分离鉴定 [杨松, 刘永华, 曲祖乙] 畜牧与兽医 2010,42 (8) 63-64
PCR在快速检测食品单核细胞增多性李斯特菌中的应用 [谭炳乾, 肖军] 湖北农业科学 2009,48 (7) 1558-1560
食源性单增李斯特菌LIPI-4基因的检测及序列分析 [刘扬扬, 康立超, 马勋, 李红欢, 钱凌霄, 李庆辉] 中国兽医学报 2019 (12) 2380-2385
单核细胞增多性李斯特菌LIPI-1全基因克隆与序列分析 [谭炳乾, 何启盖, 肖军, 陈焕春] 畜牧兽医学报 2008,39 (5) 627-633
重组蛋白P60与LLO对单核细胞增多性李斯特菌灭活疫苗的免疫增强效果 [周邦信, 才学鹏, 张少华, 巩伟, 曾巧英] 中国兽医科学 2010 (6) 609-615
单核细胞增多性李斯特菌hlyA基因序列及溶血素活性测定 [谭炳乾, 何启盖, 肖军, 陈焕春] 中国兽医学报 2009,29 (2) 161-165
食源性单增李斯特菌LPXTG蛋白基因的检测 [丁剑, 马勋, 陈朔, 曹树珠, 王贝贝, 杜冬冬, 张奇文] 中国兽医杂志 2017 (8) 17-21+25

导出引用

计量

文章访问数: 15

HTML全文浏览量: 0

PDF下载量: 0

表达绿色荧光蛋白重组单核细胞增多性李斯特菌的构建(英文)

相似文章

所属期刊

浙江大学学报(农业与生命科学版)

推荐期刊

食品工业科技

食品科学