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当前位置: 首页 > 文章 > J亚群禽白血病病毒gp85基因在重组杆状病毒中的表达及鉴定 畜牧与兽医 2011,43 (8) 4-7
Position: Home > Articles > Expression and identification of gp85 gene of J subgroup of avian leucosis virus in baculovirus system Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011,43 (8) 4-7

J亚群禽白血病病毒gp85基因在重组杆状病毒中的表达及鉴定

作  者：
倪伟;秦立廷;孙美玉;高玉龙;潘伟;王笑梅;刘思当
单  位：
山东农业大学动物科技学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所禽传染病研究室
关键词：
J亚群禽白血病病毒;gp85基因;杆状病毒
摘  要：
为获得J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的gp85蛋白,将ALV-J的gp85基因克隆至pFastBac-HTA供体质粒,将其转入DH10BacTM大肠杆菌感受态细胞,使gp85基因整合到Bacmid穿梭载体中,构建重组穿梭载体Bacmid-gp85。通过脂质体介导,将重组穿梭载体Bacmid-gp85转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacgp85。Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定结果表明ALV-J gp85蛋白在Sf9昆虫细胞中得到正确表达,表达的重组gp85蛋白分子量约为38 ku。ALV-J gp85重组蛋白在Sf9细胞中的正确表达为其功能研究和应用提供了良好的基础。
译  名：
Expression and identification of gp85 gene of J subgroup of avian leucosis virus in baculovirus system
作  者：
NI Wei1,2,QIN Li-ting1,SUN Mei-yu1,GAO Yu-long1,PAN Wei1,WANG Xiao-mei1,LIU Si-dang2(1.Division of Avian Infectious Disease,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China; 2.College of Animal Science and Technology,Shandong Agricutural University,Tai'an 271018,China)
关键词：
avian leukosis virus;J subgroup;gp85 gene;baculovirus
摘  要：
In order to obtain the gp85 protein of J subgroup of avian leucosis virus(ALV-J),gp85 gene was amplified and cloned into pFastBac-HTA to construct the recombinant donor plasmid pFastBac-HTA-gp85.Then,the pFastBac-HTA-gp85 was transformed into DH10Bac Escherichia coli competent cells to get the recombinant shuttle plasmid Bacmid-gp85.The recombinant baculovirus Bacmid-gp85 was obtained by transfecting rBac-gp85 with CellfectinR Reagen into Sf9 cells.The Western-blot analysis and indirect immunofluorescence assay revealed that the recombinant protein with the molecular weight of 38 kDa was expressed in the Sf9 cells.This study provides a good basis for functional analysis of gp85 protein of ALV-J.

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