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应用荧光定量RT-PCR检测J亚群禽白血病病毒

作  者:
屈素洁;邹联斌;陈芳芳;张步娴;胡杰;莫胜兰;施开创;李军;尹彦文
单  位:
广西壮族自治区动物疫病预防控制中心
关键词:
J亚群禽白血病病毒;Taqman探针;荧光定量PCR
摘  要:
针对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)基因序列保守区域设计一对特异性引物和一条特异性探针,通过构建重组阳性标准质粒作为阳性标准品,建立了检测ALV-J核酸的荧光定量PCR方法。优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示,该检测方法特异性强,与其它禽源病毒如A亚群禽白血病病毒(ALV-A)、B亚群禽白血病病毒(ALV-B)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、鸡传染性贫血病毒(CIAV)和马立克病病毒(MDV)均不发生交叉反应;该方法可检测到3.2×102拷贝/μL的病毒核酸,与常规RT-PCR相比,敏感性高100倍;重复性试验的变异系数小于2%。研究结果表明,建立的Real-time RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好,可用于ALV-J的定量检测。
译  名:
Development and Application of a Real-time RT-PCR Assay for Avian Leukosis Virus Subgroup J

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