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黄曲霉毒素B_1致肉仔鸡肝损伤的氧化应激机制研究

作  者:
余程;刘妍;王胜军;汪文俊
单  位:
武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室中南民族大学生命科学学院
关键词:
黄曲霉毒素B1;线粒体功能;活性氧;凋亡;抗氧化酶基因;肉鸡
摘  要:
本试验旨在研究黄曲霉毒素B_1(AFB_1)对肉鸡原代肝脏细胞线粒体氧化磷酸化、线粒体膜电位、活性氧(ROS)、细胞凋亡、抗氧化酶及其相关基因表达的影响。选取18~20日龄健康爱拔益加(AA)肉鸡分离的肉鸡原代肝脏细胞(BPHs),分为3个处理组,每个处理组5个重复,试验组分别添加1μmol/L和2μmol/L的AFB_1,对照组添加等量的DMSO。结果表明:随着AFB_1浓度的升高,线粒体Ⅲ和Ⅳ呼吸作用显著增强(P<0.05),而线粒体呼吸控制率却显著下降(P<0.05);随着AFB_1浓度的升高,线粒体电位下降,并呈现浓度依赖型模式,当AFB_1为2.5μmol/L时BPHs线粒体电位显著下降(P<0.05);AFB_1极显著引发了ROS的产生(P<0.01);高浓度的AFB_1(2.5μmol/L)处理使得BPHs细胞凋亡率明显上升(P<0.05)以及caspase-3、caspase-9表达明显增加(P<0.05);AFB_1显著提高了Nrf2的m RNA表达水平(P<0.05);与对照组相比,HO-1、SOD的m RNA表达量显著下降(P<0.05);高浓度的AFB_1(2.5μmol/L)显著提高了NQO1的m RNA表达水平(P<0.05)。以上研究结果显示,AFB_1使线粒体氧化磷酸化过程解偶联,线粒体膜电位下降,ROS大量产生,抗氧化酶活力降低,细胞发生凋亡,抗氧化酶相关基因m RNA表达下降,而Nrf2基因m RNA表达增强。AFB_1导致胞内ROS上升引发氧化应激,可能与Nrf2信号通路有关。

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