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F81细胞外囊泡介导IFN-ω上调抗病毒细胞因子表达的研究

作  者:
梁超;徐国伟;孙研;茹毅;李亚军;杨明星;张世栋;李建喜;王学智;周雨霞
单  位:
内蒙古农业大学兽医学院;中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所;中国农业科学院兰州兽医研究所
关键词:
细胞外囊泡;F81细胞;ω干扰素;水疱性口炎病毒
摘  要:
对猫肾细胞(F81)外囊泡(extracellular vesicles,EVs)介导猫omega干扰素(interferon omega,IFN-ω)调控抗病毒细胞因子变化的功能研究,为EVs介导的干扰素抗病毒机制研究提供理论基础。提取IFN-ω刺激F81细胞分泌的IFN-ω-EVs,通过Western-blotting、透射电镜、纳米粒径技术分别对IFN-ω-EVs的标志蛋白、形态、粒径进行鉴定;将携带IFN-ω的IFN-ω-EVs孵育到F81细胞,以激光共聚焦显微镜进行荧光共定位观察分析IFN-ω-EVs是否进入F81细胞,通过RT-q PCR检测ISG15、ISG56、IFN-ω细胞因子的表达水平,与IFN-ω、空白对照进行对比,以此研究IFN-ω-EVs是否对水疱性口炎病毒(VSV)具有抗病毒效应。经鉴定IFN-ω-EVs主要为杯状囊结构,携带特异性标记蛋白CD63、CD81,其粒径在50~100、250~600 nm之间;荧光共定位分析发现IFN-ω-EVs能够进入F81细胞;RT-q PCR结果表明,IFN-ω-EVs同IFN-ω一样能显著上调ISG15、ISG56、IFN-ω等抗病毒细胞因子的表达水平。重要的是VSV感染后,IFN-ω-EVs的抗VSV作用显著高于IFN-ω(P<0.05)。上述结果表明,F81提取得到的IFN-ω-EVs能够介导IFN-ω进入F81细胞中,并显著上调ISG15、ISG56、IFN-ω等抗病毒细胞因子的表达,抑制VSV增殖。

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